Thérapie génique néonatale basée sur l'AAV pour l'hémophilie A : correction à long terme et évitement des réponses immunitaires chez la souris.
AAV-based neonatal gene therapy for hemophilia A: long-term correction and avoidance of immune responses in mice.
Résumé
La thérapie génique de l'hémophilie A a été gênée par les réponses immunitaires aux antigènes associés aux vecteurs et par les anticorps neutralisants ou les inhibiteurs de la protéine du facteur VIII (FVIII) ; ces « inhibiteurs » affectent plus fréquemment les patients atteints d'hémophilie A que ceux atteints d'hémophilie B. Une stratégie de remplacement génique commençant dès la période néonatale pourrait éviter le développement de ces réponses immunitaires et conduire à une expression prolongée avec correction du phénotype, évitant ainsi les conséquences à long terme. Un virus adéno-associé (AAV) de sérotype rh10 a été développé, divisant la séquence codante du FVIII en chaînes lourdes et légères avec le promoteur de la β-actine de poulet/amplificateur du CMV pour une double administration de vecteur viral adéno-associé recombinant. Des virions de chaque chaîne du FVIII ont été co-injectés par voie intraveineuse à des souris le deuxième jour de leur vie. Les souris expriment des taux soutenus d’antigène FVIII ≥ 5 % jusqu’à 22 mois sans développement d’anticorps contre le FVIII. La correction phénotypique était manifeste chez toutes les souris traitées par AAV-FVIII, comme le démontrent les tests fonctionnels et la réduction du temps de saignement. Cette étude démontre l'utilisation de l'AAV dans une stratégie de remplacement de gène chez des souris néonatales qui établit à la fois une correction phénotypique à long terme de l'hémophilie A et un manque de développement d'anticorps contre le FVIII dans ce modèle de maladie où l'AAV est administré peu de temps après la naissance. Ces études plaident en faveur de la thérapie génique de remplacement pour les maladies diagnostiquées in utero ou au début de la période néonatale.
Abstract (English)
Hemophilia A gene therapy has been hampered by immune responses to vector-associated antigens and by neutralizing antibodies or inhibitors against the factor VIII (FVIII) protein; these 'inhibitors' more commonly affect hemophilia A patients than those with hemophilia B. A gene replacement strategy beginning in the neonatal period may avoid the development of these immune responses and lead to prolonged expression with correction of phenotype, thereby avoiding long-term consequences. A serotype rh10 adeno-associated virus (AAV) was developed splitting the FVIII coding sequence into heavy and light chains with the chicken β-actin promoter/CMV enhancer for dual recombinant adeno-associated viral vector delivery. Virions of each FVIII chain were co-injected intravenously into mice on the second day of life. Mice express sustained levels of FVIII antigen ≥5% up to 22 months of life without development of antibodies against FVIII. Phenotypic correction was manifest in all AAV-FVIII-treated mice as demonstrated by functional assay and reduction in bleeding time. This study demonstrates the use of AAV in a gene replacement strategy in neonatal mice that establishes both long-term phenotypic correction of hemophilia A and lack of antibody development against FVIII in this disease model where AAV is administered shortly after birth. These studies support the consideration of gene replacement therapy for diseases that are diagnosed in utero or in the early neonatal period.
Informations
- Identifiant
- 22241178
- Source
- PubMed
- Journal
- Gene Ther
- Date
- Décembre 2012
- Auteurs
- Hu C, Lipshutz GS.
Produit associé
Trousse ELISA du facteur VIII de coagulation du poulet
Chicken Coagulation Factor VIII ELISA Kit